Làm thế nào để chúng ta có thể đảm bảo rằng các nghiên cứu giải trình tự RNA tế bào đơn (scRNA-seq) đạt được kết quả tốt nhất? Mặc dù có nhiều yếu tố có thể ảnh hưởng đến quy trình, bước chuẩn bị mẫu đầu tiên luôn đóng vai trò then chốt và có tác động mạnh mẽ đến kết quả. Vậy điều gì tạo nên một mẫu chất lượng tốt? Tại sao quy trình vận chuyển trong việc xử lý mẫu lại quan trọng ở các giai đoạn tiếp theo?

10x Genomics hiện đã mở rộng các lựa chọn chuẩn bị mẫu cho quy trình giải trình tự tế bào đơn, cho phép các nhà nghiên cứu bắt đầu quy trình làm việc từ nhiều khởi điểm khác nhau. Nếu không thể làm việc với mẫu tươi hoặc không thể xử lý ngay lập tức, chúng ta có thể sử dụng mô đã lưu trữ hoặc các mẫu thu thập từ nhiều địa điểm và/hoặc tại các thời điểm khác nhau cho nghiên cứu của mình.

Trong blog này, chúng tôi sẽ một số câu hỏi cơ bản về quy trình chuẩn bị mẫu với giải pháp Chromium Single Cell Gene Expression Flex, giải pháp nghiên cứu tế bào đơn cho phép bạn phân tích các mẫu tươi, đông lạnh và cố định—thậm chí FFPE—với tính linh hoạt cao. Phạm vi bài blog sẽ thảo luận về các loại mẫu tương thích, các phương pháp tối ưu nhất cho việc lưu trữ và vận chuyển, các yếu tố đánh giá chất lượng, các điểm dừng trong quy trình,… Với tất cả thông tin này, chúng tôi hy vọng bạn sẽ cảm thấy thoải mái và tự tin lên kế hoạch cho các thử nghiệm với giải pháp Chromium Single Cell Flex.

Các chủ đề bao gồm:

• Các loại mẫu tương thích
• Phương pháp chuẩn bị mẫu
• Làm việc với các chất hữu cơ
• Điểm dừng và điều kiện bảo quản
• Thực hành tốt nhất cho mô FFPE
• Cân nhắc vận chuyển mẫu
• Số lượng đầu vào mẫu
• Đếm tế bào/nhân cố định
• Cải thiện khả năng phục hồi tế bào/nhân

Những loại mẫu nào sẽ tương thích với giải pháp?

Với sự linh hoạt mà giải pháp mang lại, bạn có thể bắt đầu với tế bào, nhân hoặc mẫu mô tươi, đông lạnh hoặc đã được cố định từ người hoặc chuột. Quy trình này đã được thử nghiệm rộng rãi với nhiều loại mô này và bạn có thể tham khảo tóm tắt kết quả thông qua tài liệu hỗ trợ của chúng tôi đối với các mẫu tươi và đông lạnh nhanh hoặc các mô được thử nghiệm FFPE .

Phương pháp chuẩn bị mẫu nào nên được thực hiện?

Vấn đề này phụ thuộc lớn vào mẫu đầu vào và câu hỏi nghiên cứu. Trong quy trình của Chromium Flex, các mẫu cần phải trải qua bước cố định trước khi được lai với các đầu dò phiên mã. Tuy nhiên, có nhiều lựa chọn linh hoạt cho việc xử lý mẫu trước khi cố định. Bạn đang làm việc với loại mẫu nào? Khung thời gian bạn muốn xử lý mẫu theo lịch trình nghiên cứu của mình ra sao? Bạn quan tâm đến những tính năng nào? Những chi tiết này sẽ xác định điểm xuất phát của bạn. Hãy cùng xem xét các tùy chọn cho từng loại mẫu khác nhau.

Các dòng tế bào và huyền phù tế bào

Để đạt kết quả tối ưu, chúng tôi khuyến nghị huyền phù tế bào đầu vào nên có tỷ lệ sống sót cao (~80%). Tuy nhiên, quy trình làm việc của Flex đã được chứng minh là tương thích với các mẫu đầu vào đầy thách thức, và dữ liệu thu được từ các mẫu có tỷ lệ sống sót thấp hơn cũng cho thấy kết quả khả quan. Điều này chứng tỏ độ nhạy cao của hóa chất trong giải pháp Flex.

Mẫu mô tươi

Nếu bạn đang làm việc với mẫu mô tươi, bạn có nhiều lựa chọn khác nhau. Trước khi cố định, bạn có thể phân tách thành huyền phù tế bào, tách nhân, hoặc băm nhỏ mô thành từng miếng nhỏ. Các phương pháp thực hành tiêu chuẩn tốt nhất được áp dụng cho quá trình phân ly và phân lập nhân. Quá trình phân ly mới đòi hỏi các tế bào sống sót làm đầu vào cho quy trình cố định, vì vậy cần phải xử lý cẩn thận. Các khuyến nghị về tỷ lệ sống cũng được áp dụng tương tự cho các dòng tế bào và huyền phù tế bào. Điều này chứng minh quá trình phân ly có một số lợi thế sau:

• Kết quả đa dạng: Làm việc với các tế bào tươi, nguyên vẹn mang lại cơ hội lập hồ sơ biểu hiện protein bề mặt tế bào cùng với biểu hiện gen.
• Mẫu được làm giàu: Bạn có thể chọn thực hiện nhuộm kháng thể để làm giàu cho các loại tế bào quan tâm trước khi tiến hành cố định.
• Quy trình làm việc được tối ưu hóa: Nếu bạn đã có sẵn quy trình được tối ưu hóa mang lại tế bào chất lượng cao cho loại mẫu của mình, bạn có thể tích hợp sử dụng quy trình đó.

Nếu bạn đang phân lập nhân, mức đầu vào cần thiết cho quá trình lai đầu dò có thể sẽ cao hơn so với huyền phù tế bào, tùy thuộc vào năng suất. Đối với những người chưa có quy trình thử nghiệm để phân lập hạt nhân, bạn có thể muốn xem Nuclei Isolation Kit, được thiết kế để cung cấp một điểm khởi đầu dễ dàng và đáng tin cậy cho nhiều mô người và chuột. Thông tin về các mô đã được kiểm tra và năng suất dự kiến có sẵn trên trang web hỗ trợ của chúng tôi, cung cấp hướng dẫn hữu ích về trọng lượng ban đầu được khuyến nghị cho mẫu của bạn.

Bây giờ chúng ta hãy chuyển sang lựa chọn thứ ba—cắt mẫu mô của bạn thành những miếng nhỏ theo Chop/Fix protocol, trong đó những phần nhỏ này được cố định trước khi phân ly thành huyền phù tế bào. Một số lợi ích bao gồm:

Chop/Fix có thể mang lại hiệu suất xét nghiệm tốt hơn so với việc tách nhân do hiệu suất cao hơn và có khả năng làm giảm hiện tượng vón cục.

• Quá trình cố định mô trước khi phân ly có thể giúp bạn bảo tồn các tế bào mỏng manh không thể tồn tại bằng các phương pháp phân ly khác.
• Việc tách rời quy trình cố định và phân ly giúp giảm bớt các hạn chế về mặt dụng cụ thiết bị, cho phép bạn cố định mẫu tại điểm thu nhận mẫu, vận chuyển đến vị trí trung tâm và phân tách sau đó.
• Hai quy trình có sẵn cho bước trình phân ly tế bào/nhân: một phiên bản dựa trên thiết bị sử dụng Bộ phân ly Octo GentleMACS và một phiên bản thủ công không sử dụng thêm thiết bị thí nghiệm nào.

10x Genomics đã thử nghiệm và tối ưu hóa các bước này để hoạt động với nhiều loại mô khác nhau và đã cung cấp dữ liệu về năng suất dự kiến như một phần của tài liệu quy trình.

Mô đông lạnh

Đối với các thí nghiệm với mô đông lạnh nhanh, bạn có hai tùy chọn: phân ly nhân và phương pháp Chop/Fix. Những lợi ích và cân nhắc tương tự mà chúng ta đã thảo luận đối với quy trình làm việc với mô tươi này cũng được áp dụng ở đây.

Minh họa các quy trình chuẩn bị mẫu cho Chromium Single Cell Flex, khi bắt đầu với các dòng tế bào, huyền phù tế bào, mô tươi hoặc mô đông lạnh.

Mô FFPE

Các mô đã lưu trữ của bạn có thể được phân tích thông tin biểu hiện gen bằng phương pháp giải trình tự tế bào đơn. Các mẫu FFPE có thể được sử dụng làm mẫu đầu vào cho quy trình Flex. Giống như phương pháp Chop/Fix ở trên, protocol cho việc phân ly cho các mẫu FFPE luôn có sẵn cho quy trình làm việc thủ công hoặc tự động, cả hai đều đã được thử nghiệm với các mẫui mô được bảo quản từ 1–10 năm. Theo kinh nghiệm của chúng tôi, cả hai phương pháp đều mang lại số lượng tế bào, tỷ lệ loại tế bào và độ nhạy xét nghiệm tương tự nhau, nhưng bạn có thể thấy rằng kết quả khác nhau tùy theo loại mô.

Chúng tôi đã biên soạn danh sách các mô FFPE được thử nghiệm bằng quy trình làm việc Flex, có sẵn tại đây . Nếu mẫu mô của bạn không có trong danh sách này, bạn có thể tham khảo các mẫu mô khác có đặc điểm tương tự. Quy trình bảo quản mẫu FFPE chưa được tiêu chuẩn hóa, do đó chúng tôi dự đoán rằng một số mẫu mô có thể hoạt động tốt hơn các mẫu khác, bất kể loại mô nào. Các khối chất lượng thấp có thể dẫn đến độ biến thiên cao và độ nhạy thấp khi xác định tế bào.

Ngoài ra, dựa trên thử nghiệm nội bộ hạn chế, chúng tôi đã quan sát thấy việc tạo thành công các thư viện phiên mã từ mô phân tách thu được từ 20 mẫu FFPE có độ dày 5 μm trên các phiến kính. Khi sử dụng gấp đôi lượng mẫu đầu vào, chúng tôi nhận thấy kết quả có thể so sánh với kết quả được tạo ra bằng hai lát cắt FFPE 25 μm về độ nhạy xét nghiệm, dữ liệu có thể sử dụng và chú thích loại tế bào, với mức giảm năng suất tế bào ở mức khiêm tốn. Bạn có thể tìm thấy quy trình làm việc chi tiết để làm việc với các phần trên của lam kính trong bài viết này.

Các mẫu organoid có thể được lập hồ sơ biểu hiện gen bằng Chromium Flex không?

Có, các organoid tương thích với quy trình của giải pháp Chromium Flex. Chúng tôi khuyên bạn nên phân ly enzyme của mô hữu cơ thành huyền phù tế bào tươi. Chú ý tối ưu hóa thời gian tiêu hóa để tạo ra các tế bào khỏe mạnh. Từ đó, huyền phù tế bào đơn có thể được cố định theo quy trình cố định tế bào cụ thể cho xét nghiệm Flex. Chúng tôi khuyên bạn nên thực hiện thử nghiệm khảo sát trước khi chuyển sang thử nghiệm toàn diện và có thể tìm thấy các hướng dẫn chung của chúng tôi về mẫu organoid và tất cả các xét nghiệm tế bào đơn 10x Genomics.

Điểm dừng được xác nhận để lưu trữ mẫu là gì? Mẫu có thể được lưu trữ trong bao lâu?

Như chúng ta đã thảo luận ở trên, việc cố định mẫu là một phần không thể thiếu của quy trình Flex và các mẫu cố định thu được có thể được lưu trữ mà không ảnh hưởng đến chất lượng thông tin biểu hiện gen. Điều này có nghĩa là bạn có thể tùy chỉnh quy trình làm việc của mình với nhiều điểm dừng tùy chọn.

Điều này có tác động thực tế gì đến thí nghiệm của bạn? Bạn có thể xử lý các mẫu theo lô -thậm chí từ nhiều địa điểm thu thập-rồi chạy tất cả chúng cùng nhau sau đó. Bạn có thể lưu các phần bổ sung của mẫu trong trường hợp bạn cần khắc phục sự cố hoặc thực hiện các lần chạy lặp lại. Bạn có thể dễ dàng chạy thử nghiệm khảo sát vì bạn sẽ có quyền truy cập thuận tiện vào nhiều mẫu hơn được xử lý theo cùng một cách cùng một lúc.

Vậy, những điểm dừng này trong quy trình Chromium Flex ở đâu?

Sau cố định

Huyền phù tế bào hoặc nhân cố định, các mảnh mô cắt nhỏ cố định và mẫu FFPE phân ly có thể được bảo quản ngắn hạn ở nhiệt độ 4°C trong tối đa 1 tuần và tối đa 6 tháng ở -80°C.

Lưu ý rằng quy trình Chop/Fix cũng cho phép bạn dừng quy trình sau khi cố định các mảnh mô nhỏ. Bạn vẫn sẽ cần phải phân tách các mảnh này để tạo ra huyền phù tế bào cố định trước khi tiến hành lai. Kết quả huyền phù tế bào cố định là điểm dừng thứ hai của phương pháp Chop/Fix.

Sau khi lai các đầu dò

Có một điểm dừng cuối cùng trong protocol Flex trước khi phân vùng tế bào hoặc nhân của bạn. Sau khi cố định, các mẫu được thẩm thấu và sau đó được lai với các bộ đầu dò. Tại thời điểm này, bạn có thể bảo quản các mẫu lai của mình trong tối đa 6 tháng ở nhiệt độ -80°C hoặc tiến hành thu thập tế bào/nhân trực tiếp trên thiết bị Chromium.

Minh họa quy trình làm việc tổng thể cho Chromium Gene Expression Flex, nêu bật các điểm dừng tùy chọn sau khi cố định mẫu và sau khi lai đầu dò.

Các phương pháp tốt nhất để xử lý các mẫu FFPE nhằm chuẩn bị cho các thí nghiệm tế bào đơn là gì?

Lưu trữ khối mô FFPE

Các khối mô FFPE có thể được (và thường là) được bảo quản ở nhiệt độ phòng. Tuy nhiên, để có hiệu suất tế bào đơn tối ưu, chúng tôi khuyên bạn nên bảo quản ở nhiệt độ 4°C và tránh sáng. Những điều kiện này có thể giảm thiểu hoặc làm chậm quá trình phân hủy RNA và giúp đảm bảo thành công với các ứng dụng NGS như lập hồ sơ biểu hiện gen tế bào đơn.

Cắt các lát mô FFPE

Hãy đảm bảo rằng thiết bị của bạn không bị nhiễm RNase và sử dụng lưỡi dao mới để cắt. Đảm bảo đủ thời gian để bù nước cho khối mô trước khi cắt. Các bước này sẽ giúp đảm bảo tạo ra các lát cắt mô nguyên vẹn và chất lượng cao. Đối với bất kỳ bước chuyển giao nào, hãy xử lý nhẹ nhàng để tránh ảnh hưởng đến lát mô. Nếu bạn chưa quen hoặc chưa cảm thấy thoải mái với việc cắt mô FFPE, chúng tôi khuyên bạn nên thực hành trước khi tiếp tục tạo các lát cắt cho thử nghiệm tế bào đơn của mình.

Xử lý các lát cắt mô FFPE

Hãy nhẹ nhàng với những lát cắt mô FFPE; một lát cắt nguyên vẹn có thể giúp tối ưu độ thu hồi tế bào. Nếu cần chuyển lát cắt sang ống khác, 10x Genomics khuyến cáo nên tránh sử dụng kẹp và thay vào đó, hãy chạm vào ống để chuyển. Ngoài ra, khi thêm thuốc thử vào ống, hãy đảm bảo pipet dọc theo thành ống, không pipet trực tiếp lên phần cuộn tròn. Tuân thủ những thao tác này sẽ giúp giảm thiểu thiệt hại cho mẫu của bạn.

Tôi nên vận chuyển mẫu như thế nào sau khi lấy và trước khi cố định?

Nếu bạn đang sử dụng quy trình Chop/Fix, bạn có thể chuẩn bị mẫu cố định để bảo quản ngắn hạn (tối đa một tuần) ở 4°C hoặc bảo quản dài hạn (tối đa sáu tháng) ở -80°C trước khi phân ly. Các lát cắt mô cố định được chuẩn bị để bảo quản ngắn hạn có thể được vận chuyển bằng túi lạnh, còn các lát cắt mô chuẩn bị để bảo quản dài hạn có thể được vận chuyển bằng đá khô.

Nếu không, chúng tôi khuyến nghị mô nên được đông lạnh nhanh trong nitơ lỏng và sau đó vận chuyển trên đá khô. Trong thời gian dưới 24 giờ, có thể sử dụng thuốc thử bảo quản lạnh trước khi bảo quản và vận chuyển ở nhiệt độ 4°C. Tuy nhiên, nếu tiếp tục vận chuyển ở nhiệt độ 4°C, chúng tôi đặc biệt khuyên bạn nên bắt đầu bằng thử nghiệm khảo sát, vì một số yếu tố, bao gồm loại mô, tình trạng bệnh và khoảng thời gian giữa quá trình thu thập và xử lý mẫu, có thể ảnh hưởng đến chất lượng dữ liệu sau này.

Việc vận chuyển các khối mô FFPE được ưu tiên hơn so với các lát cắt FFPE vì các lát cắt nhạy cảm và dễ bị hư hại hơn. Nếu bạn không thể vận chuyển các khối FFPE, bạn có thể đặt các lát cắt trong các ống Eppendorf 1.5 ml riêng lẻ và đậy kín. Chúng tôi khuyên bạn nên cố định các ống để giảm thiểu rung lắc trong quá trình vận chuyển và sử dụng thêm túi lạnh trong trường hợp có sự thay đổi nhiệt độ đáng kể. Tương tự như việc bảo quản mẫu FFPE, chúng tôi khuyên bạn nên vận chuyển ở nhiệt độ 4°C.

Tôi cần bao nhiêu tế bào hoặc nhân làm đầu vào? Tôi cần bao nhiêu mẫu mô để bắt đầu?

Điều này phụ thuộc vào điểm xuất phát của bạn, tức là phương pháp chuẩn bị mẫu mà bạn đã chọn. Đối với huyền phù tế bào tươi, chúng tôi khuyên bạn nên chuẩn bị ít nhất 300.000 tế bào sống để đạt độ phục hồi tế bào tối ưu nhất. Mẫu có tỷ lệ tế bào sống hơn 80% sẽ mang lại độ nhạy cao nhất trong việc lập hồ sơ tế bào đơn lẻ, nhưng chúng tôi vẫn quan sát thấy kết quả thành công với mẫu có tỷ lệ tế bào sống thấp (50% hoặc ít hơn). Nếu bạn đang cô lập các nhân, mức đầu vào của bạn phải cao hơn một chút so với mức huyền phù tế bào tươi, với khuyến nghị ít nhất là 500.000 nhân để tối đa hóa khả năng phục hồi. Trong trường hợp cuối cùng này, bạn có thể cần bắt đầu với số lượng mô cao hơn, tùy thuộc vào năng suất quan sát được.

Người dùng có kinh nghiệm có thể cân nhắc chuyển sang cố định với ít tế bào hoặc nhân hơn (tối đa 100.000 tế bào hoặc nhân là an toàn), nhưng nên lưu ý rằng dự kiến sẽ có một số tế bào bị mất trong suốt quá trình thao tác và bạn có thể gặp nguy cơ không có đủ tế bào hoặc nhân cho ứng dụng tiếp theo. Xử lý mẫu đúng cách và đếm tế bào chính xác có thể giúp giảm thiểu những tổn thất này (xem các khuyến nghị trong các phần bổ sung bên dưới).

Đối với Bộ ly nhân và phương pháp Chop/Fix, chúng tôi nhận thấy 25 mg là đủ cho hầu hết các loại mô được thử nghiệm, thường tạo ra đủ tế bào hoặc nhân để đáp ứng các khuyến nghị lai tạo của chúng tôi. Thông tin về sản lượng tế bào mà chúng tôi thu được từ 25 mg các loại mô người và chuột khác nhau (đông lạnh nhanh hoặc tươi) có thể được tìm thấy.

Nếu bạn đang thao tác với các mẫu FFPE, chúng tôi khuyên bạn nên bắt đầu với hai lát cắt mô với kích thước khoảng 25 µm mỗi lát. Tuy nhiên, số phần bạn cần sẽ phụ thuộc vào loại mô, kích thước mô và số lượng cần cân nhắc. Ví dụ, các mô có mật độ tế bào dày đặc (như hạch bạch huyết) có thể chỉ cần một phần 25 µm để đạt được lượng đầu vào cần thiết, trong khi các mẫu nhỏ hơn (như sinh thiết đục lỗ) có thể yêu cầu nhiều hơn hai lát.

Làm cách nào tôi có thể đảm bảo số lượng chính xác cho các tế bào hoặc  nhân cố định?

Việc đếm tế bào đóng vai trò then chốt trong việc đạt hiệu suất xét nghiệm tối đa, giúp đảm bảo khả năng phục hồi tế bào đáp ứng nhu cầu thử nghiệm của bạn. Nhìn chung, các phương pháp đếm tế bào tốt nhất vẫn được áp dụng đối với giải pháp Chromium Gene Expression Flex. Tuy nhiên, có một lưu ý quan trọng: chúng tôi khuyên bạn nên nhuộm các mẫu cố định bằng thuốc nhuộm huỳnh quang thay vì Trypan Blue. Sai lệch trong việc đếm số lượng tế bào có thể xảy ra khi Trypan Blue nhuộm cả các mảnh vụn tế bào cố định.

Vì những lý do này, chúng tôi khuyến cáo nên nhuộm bằng thuốc nhuộm huỳnh quang như dung dịch nhuộm ethidium homodimer-1 hoặc propidium iodide (PI), sau đó sử dụng máy đếm tế bào huỳnh quang tự động để cải thiện độ chính xác. Các mẫu không có mảnh vụn, chẳng hạn như huyền phù tế bào hoặc nhân, vẫn có thể được đếm bằng cách sử dụng Trypan Blue nếu muốn.

Hãy chắc chắn chú ý đến các thông số kỹ thuật của máy đếm tế bào, bao gồm nồng độ tế bào tối ưu và giới hạn kích thước tế bào. Ngoài giới hạn kích thước tối đa thì chúng ta cũng cần lưu ý kích thước tế bào tối thiểu vì một số thiết bị có thể không tương thích với kích thước tế bào hoặc nhân nhỏ.

Ví dụ về việc đếm tế bào đối với các mẫu cố định sử dụng thuốc nhuộm Trypan Blue và huỳnh quang.

Làm cách nào tôi có thể cải thiện khả năng phục hồi tế bào/nhân của mình?

Một số nguyên tắc cơ bản được áp dụng ở đây cũng như áp dụng cho tất cả các nghiên cứu về các tế bào đơn. Hãy chắc chắn bắt đầu với các mẫu được phân tách hoàn toàn. Điều quan trọng nữa là giảm thiểu sự hiện diện của các chất kết tụ và mảnh vụn trong huyền phù của bạn để tối ưu hóa quá trình phục hồi tế bào.

Việc mất một số tế bào hoặc nhân là bình thường khi thao tác, với tỷ lệ phần trăm chính xác tùy thuộc vào một số yếu tố, bao gồm loại tế bào, số lượng tế bào và mật độ tế bào từ mẫu đầu vào của bạn. Từ việc cố định mẫu cho đến nạp lên chip, bạn có thể mất từ 10% đến 50% tế bào hoặc nhân. Tuy nhiên, việc lựa chọn thiết bị và áp dụng các kỹ thuật xử lý phù hợp có thể giúp tối ưu hóa khả năng phục hồi.

Thiết bị

• Sử dụng các ống ly tâm siêu nhỏ có độ bám dính thấp để giảm độ bám dính của mẫu vào bề mặt ống.
• Sử dụng máy ly tâm rotor văng (swinging bucket rotor) để tạo pellet chắc chắn hơn và giảm thiểu mất mát trong quá trình rửa.
• Tăng tốc độ và/hoặc thời gian ly tâm để cải thiện quá trình tạo pellet mẫu.

Kỹ thuật

• Khi loại bỏ phần dịch nổi phía trên, tránh pipet gần pellet để hạn chế khả năng hút tế bào
• Để lại tối đa 30 μl dịch nổi phía trên trong các bước rửa để không ảnh hưởng đến pellet
• Thực hiện một thí nghiệm thí điểm để tối ưu hóa sự phân ly của mô cố định trước khi chuyển sang nghiên cứu có quy mô lớn hơn.

Lên kế hoạch là chìa khóa để thành công

Các tùy chọn xét nghiệm tế bào đơn đã được mở rộng cho nhiều loại mẫu khác nhau, tăng tính linh hoạt trong việc xác định lịch trình phù hợp nhất với nhu cầu thử nghiệm của bạn. Tuy nhiên, cùng với những lựa chọn này là các câu hỏi đa dạng hơn về cách tiến hành hiệu quả nhất. Lời khuyên của chúng tôi là: hãy lên kế hoạch kỹ lưỡng. Hãy xem xét loại mẫu bạn có, xác định mục tiêu thử nghiệm và phác thảo các bước chuẩn bị cần thiết. Chúng tôi hy vọng đã cung cấp cho bạn thông tin quan trọng để bắt đầu và mời bạn tham khảo thêm các tài liệu bổ sung để chọn lựa giải pháp tế bào đơn phù hợp và đạt được kết quả mong muốn cho câu hỏi nghiên cứu của mình.

Tham khảo

Andrea Wallace. (2023, ngày 24 tháng 3). Lập kế hoạch cho thí nghiệm tế bào đơn của bạn với Flex: Câu hỏi thường gặp đối với các mẫu Tươi, Đông lạnh và FFPE. https://www.10xgenomics.com/blog/planning-your-single-cell-experiment-with-flex-faqs-for-fresh-frozen-and-ffpe-samples