Những mẹo hữu ích khi nạp mẫu vào máy đo quang phổ NanoDrop Eight

Máy quang phổ Thermo Scientific NanoDrop Eight nhỏ gọn có thể đo tám mẫu cùng một lúc trong vòng chưa đầy 20 giây. Đây là lựa chọn lý tưởng cho các nhà nghiên cứu dược phẩm/công nghệ sinh học cần để đo các mẫu axit nucleic và protein với thông lượng cao để phục vụ cho các dự án nghiên cứu với quy mô lớn. Công nghệ Acclaro Sample Intelligence tích hợp giúp xác định và hiệu chỉnh các chất gây nhiễu hiện diện trong mẫu. Tất cả các đặc điểm trên giúp đưa ra quyết định chính xác về chất lượng mẫu và cải thiện thành công của các ứng dụng sau đó. Tuy nhiên, để tối ưu kết quả đọc với NanoDrop Eight, chúng ta cần tham khảo những mẹo hữu ích sau: 

Bước 1: Bắt đầu

Đặt thanh từ tính định hướng pipe ở bên trái hoặc bên phải tùy thuộc vào thói quen, sở thích của người thao tác để tối ưu việc sử dụng thanh

Bước 2: Đảm bảo thiết bị NanoDrop Eight không được đặt gần lỗ thông hơi hoặc quạt hút từ các thiết bị gần đó.

Đảm bảo thiết bị NanoDrop Eight không được đặt gần lỗ thông hơi hoặc quạt hút từ các thiết bị gần đó. Một lỗ thông hơi hoặc quạt có thể dẫn đến thay đổi nồng độ do bay hơi. 

Bước 3: Làm sạch bề mặt bệ

Bệ có thể được làm sạch và phục hồi bằng NanoDrop Pedestal Reconditioning Compound (PR-1), giúp khôi phục tính kỵ nước của bệ. 

Nếu không có sẵn hóa chất PR-1, nạp  5,0 µL dung dịch nước khử ion xuống bệ dưới, hạ cánh tay xuống để hình thành cột chất lỏng giữa hai bệ. Sau đó, đợi khoảng 30 giây trước khi lau sạch nước bằng khăn giấy không bụi chuyên dụng cho phòng thí nghiệm. 

Bước 4: Sử dụng pipet đa kênh thể tích nhỏ (0,5 – 10 µL). 

Pipet được thiết kế để phân phối phạm vi thể tích lớn có thể không được hiệu chuẩn chính xác ở mức thấp nhất trong thang đo (1,0 – 2,0 µL), dẫn đến thể tích phân phối ít hơn dự kiến. 

Nếu sử dụng pipet điện tử, không lấy thể tích lớn để phân chia nhiều phần. Rút và phân phối từng phần 1,0 – 2,0 µL cho mỗi chu kỳ đo. 

Nên sử dụng pipet dàn trải có thể điều chỉnh được khi lấy mẫu từ giá đỡ ống. 

Bước 5: Tránh sử dụng đầu lọc pipet

Không nên dùng đầu lọc vì các hạt của bộ lọc có thể ảnh hưởng đến phép đo độ hấp thụ ở bước sóng 230nm. 

Bước 6: Luôn thay đầu tip pipet sau mỗi lần hút nhả mẫu

Đầu tip mới sẽ đảm bảo rằng không có mẫu còn sót lại trong đầu tip – yếu tố có thể ảnh hưởng nghiêm trọng đến chất lượng của đo. 

Bước 7: Không sử dụng pipet đơn kênh khi đo nhiều mẫu

Phần bay hơi đáng kể trong một số vị trí đầu tiên sẽ dẫn đến kết quả đo sai (hình 2).

• Đảm bảo rằng lượng mẫu đủ được hút bằng pipet vào trung tâm của mỗi bệ. 
• Nếu các đầu hút không được đặt đúng cách trên mỗi rãnh của pipet, pipet có thể không hút hoặc phân phối đủ thể tích lên mỗi bệ.
• Xác nhận sự hình thành của các cột chất lỏng giữa mỗi bệ sau khi bắt đầu đo. 
• Lưu ý xem tất cả các cột có còn ở giữa không trong suốt chu kỳ đo. Các cột quá mỏng hoặc lệch sang một bên có thể không che phủ hoàn toàn tâm sợi quang của mỗi bệ, dẫn đến kết quả đo không chính xác.

Thiết bị NanoDrop Eight

Thiết bị NanoDrop Eight là một công cụ tiên tiến, lý tưởng cho việc đo lường chính xác và nhanh chóng các mẫu DNA, RNA và protein trong các môi trường nghiên cứu và sản xuất có  lượng mẫu lớn. Để tận dụng tối đa hiệu suất của thiết bị này trong phòng thí nghiệm, việc chọn đúng loại pipet là rất quan trọng, đặc biệt khi làm việc với các mẫu có thể tích nhỏ. Sử dụng pipet đơn kênh có thể dẫn đến việc nạp mẫu cho tám vị trí trên thiết bị NanoDrop Eight mất nhiều thời gian, từ đó gây ra sai số do hiện tượng bay hơi. Để đảm bảo kết quả đo chính xác, cần tuân thủ các yêu cầu như không đặt máy gần lỗ thông hơi, giữ cho môi trường xung quanh máy luôn sạch sẽ, thay đầu tip thường xuyên, không sử dụng đầu lọc tip, và đặc biệt là kiểm tra cột chất lỏng hình thành sau khi nạp mẫu để đảm bảo thể tích chính xác.

Nguồn tham khảo: Thermo Fisher Scientific. (2024). NanoDrop Eight Spectrophotometer Sample Loading Helpful Tips